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自主复制序列结合因子1结合位点拷贝数对基因沉默的影响

作者:张新民 于群 毕鑫 刘楠 王浩天 成岩 颜炜...自主复制序列基因沉默酿酒酵母

摘要:目的 研究自主复制序列结合因子1(Autonomously replicating sequence-Binding Factor,Abf1)的拷贝数对基因沉默的影响.方法 用右侧带有报告基因URA3的不同拷贝数的abf1p结合位点,以及不带任何结合位点的序列替代酵母基因组HML区域的HML-I沉默子后,在HML-E存在和不存在这两种情况下,比较URA3基因表达量的差异.结果 在HML-E沉默子存在的条件下,在缺失尿嘧啶合成缺陷型培养板(-ura)上,所有的菌体生长状态相差不多,但是在5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,FOA)平板上,随拷贝数的增加,菌株生长状态越好.但是在HML-E不存在的条件下,无论是-ura还是FOA平板上酵母都无法存活.结论 Abf1p结合位点独自无法对插入的外源基因进行沉默,它形成基因沉默需要沉默子的帮助,并且随着拷贝数增加基因沉默的能力增强.

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中国老年学

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