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STAT3靶向短发夹RNA干扰重组载体对结肠癌SW480细胞的沉默作用

作者:王朝阳 崔春晖 姚晓军 黄宗海结肠癌stat3rna干扰基因表达

摘要:目的探讨STAT3基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对结肠癌SW480细胞STAT3基因的干扰作用。方法根据siRNA设计原则,构建靶向STAT3基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/STAT3),使用脂质体法转染人结肠癌细胞系(SW480),通过RT-PCR和Western印迹检测结肠癌SW480细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平。结果pGPU6/GFP/STAT3重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确。质粒成功转染SW480细胞后,该细胞的STAT3mRNA和蛋白表达明显下降(P〈0.05)。结论成功构建靶向STAT3基因的shRNA表达载体,转染SW480细胞,能有效抑制细胞的STAT3mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供前期的实验依据。

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