作者：彭彦辉 王亮 陈卫云 郝玉宾 邢邯英rna干扰食管癌人端粒酶逆转录酶端粒酶
摘要：目的研究载体介导RNA干扰技术（RNAi）对人食管癌细胞株ECA109端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTERT）表达及端粒酶活性的抑制作用。方法设计并构建3条hTERT基因的siRNA序列干扰质粒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及对照质粒,并将其分别转染ECA109食管癌细胞,应用RT-PCR法观察各转染细胞hTERTmRNA表达水平的改变,末端重复片段扩增-酶联免疫吸附（TRAP-ELISA）方法测定细胞端粒酶活性。结果与对照质粒比较,转染24 h后,干扰质粒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组细胞端粒酶活性均显著下降（P〈0.01）;转染48 h后,各干扰质粒的抑制率依次为49%、79%、53%。干扰质粒转染ECA109细胞中hTERTmRNA的表达较对照质粒转染ECA109细胞中hTERTmRNA的表达量显著下降,仅为对照组的55.4%。结论成功构建载体介导的hTERT靶向RNA干扰重组体,能有效抑制ECA109细胞端粒酶活性及hTERTmRNA的表达。
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