作者:洪权 肖博晗 魏日胞 汪杨 刘晓峦 冯哲 陈...衰老活性氧肾小管上皮细胞凋亡
摘要:目的探讨葡萄籽提取物(Grape seed extract proanthocyanidin,GSPE)对缺血再灌注(I/R)导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用。方法分离培养24月龄Wistar雄性大鼠的原代肾小管上皮细胞,第3代后,将细胞分为对照组、10μmol/L Antimycin A处理组、GSPE干预组以及Antimysin A+GSPE组。Anexin V/PI染色,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡情况,定量PCR和Western印迹法分别检测Caspase-3mRNA和蛋白表达水平,化学发光法检测细胞Capsase-3活性及过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。激光共聚焦检测细胞内活性氧(ROS)的浓度。结果(1)衰老大鼠肾小管细胞经Antimycin A处理后,凋亡率增高,Caspase-3,MDA,ROS明显增加,SOD下降;(2)经GSPE干预后,其凋亡情况明显好转,caspase-3、MDA、ROS明显降低。SOD含量部分恢复(P〈0.05)。结论老年大鼠肾小管细胞在I/R损伤时,ROS堆积,线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。GSPE可清除ROS从而达到抑制肾小管上皮细胞凋亡、减轻I/R损伤的作用。
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