作者：孙弦 周盛年 张明丽 魏先森 刘黎青骨髓基质干细胞基因转染noggin分化神经细胞
摘要：目的构建Noggin基因的表达载体,分离骨髓基质干细胞（BMSCs）,探讨转染Noggin基因的BMSCs在体外分化为神经元样细胞的情况。方法应用RT-PCR技术扩增Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2＋〔Tα1〕-Noggin,分离、培养大鼠BMSCs,借助脂质体将Noggin基因转入BMSCs。观察诱导后细胞形态变化,利用免疫细胞化学方法鉴定分化细胞是否表达神经细胞特异性烯醇化酶（NSE）、微管相关蛋白-2（MAP-2）以及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。利用RT-PCR方法检测神经细胞标记物mRNA的表达。结果成功构建Noggin基因的真核表达载体并分离培养BMSCs。转染Noggin基因表达载体后,分化的BMSCs形态似神经细胞;免疫化学检测到NSE、MAP-2特异性标志物表达,未检测到GFAP表达;RT-PCR测得神经细胞标记物GAP43、NCAM、SYN1表达。结论从形态、蛋白、基因水平证实转染Noggin基因的BMSCs在体外可以分化为具有部分功能的神经细胞。
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