作者：金宁 张灵 肖博晗 孔祥波膀胱癌pdecgfrna干扰凋亡
摘要：目的探讨RNA干扰技术沉默血小板源性内皮生长因子基因（platelet-derived endothelial cell growth factor,PDECGF）表达诱导人膀胱癌细胞凋亡的机制。方法针对人PDECGF mRNA序列设计合成编码干扰RNA（siRNA）的DNA模板,siRNA;构建含RNA聚合酶启动子Ⅲ转录载体pRNAT-U6/Neo并能形成发夹结构小干扰RNA（siRNA）的psiPDECGF质粒;用其转染人膀胱癌T24细胞株,采用RT-PCR、Western印迹法观察转染前后PDECGF基因及相关基因表达变化,采用凋亡DNA琼脂糖凝胶电泳及吖啶橙/溴化乙啶染色法观察细胞凋亡。结果显示PDECGF siRNA对膀胱癌T24细胞中PDECGF基因表达产生明显抑制作用;转染psiPDECGF-2细胞组PDECGF mRNA水平明显降低,上述重组质粒可诱导T24细胞凋亡,同时caspase-3、p53蛋白水平明显增高。结论证实psiPDECGF-2可抑制PDECGF在T24细胞的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。其机制与caspase-3、p53蛋白水平表达增高有关。
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