作者：李长锋 张斌 王志成 杨海山 潘奇正rna干扰survivin流式细胞术mtf增殖
摘要：目的构建靶向生存素（survivin）基因的RNA干扰（RNAi）载体，观察其联合X射线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖影响。方法根据GenBank中survivin的cDNA序列设计干扰序列，构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin。酶切、测序鉴定正确后，干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞，联合5 Gy射线照射，应用PI单染、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡变化，MTT检测细胞增殖的变化。结果酶切和测序结果显示，载体构建正确；转染空载体pGenesil2对细胞G0／G1期、S期及凋亡，增殖能力影响不大，降低了G2／M期（P〈0.05）；而干扰质粒pGenesil2-survivin能延长G0／G1期，缩短S期，诱导细胞凋亡增加，降低细胞增殖能力（P〈0．05）；5 Gy照射对细胞周期影响不大，增加细胞凋亡，降低增殖能力（P〈0．05）；转染pGenesil2-smwivin后，进行5 GyX射线照射，延长G0／G1期，缩短S期，诱导细胞凋亡增加，降低细胞增殖能力（P〈0．05，P〈0．01）。结论靶向SUrvivin的RNAi可延长G0／G1期，缩短S期，增加细胞凋亡，降低细胞增殖能力，X射线照射能够增强该质粒的作用。
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