作者:胡敬海 管旌旌 沈彬 姚子明 王春喜tip30真核表达载体克隆序列分析
摘要:目的构建抑癌基因TIP30的真核表达载体并进行序列测定。方法从人正常肾组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增TIP30的基因编码区序列,将PCR片段定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),并进行序列测定。结果提取人正常肾组织总RNA并经RT-PCR扩增后,产生特异性条带,位置在800bp左右,与预期相符;pcDNA3.1-TIP30用BamH1和EcoRI双酶切后产生2条带,均与预定位置相符;TIP30基因编码区序列与GenBank登录号AF039103文献报道的序列同源性为100%,目的基因与载体正确连接。结论成功克隆了抑癌基因TIP30的基因编码区序列,并构建了其真核表达载体pcDNA3.1-TIP30,为后续转染和表达的实验研究奠定了基础。
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