作者:陈晓东 林建华软骨细胞退变增殖去分化
摘要:目的对体外培养大鼠软骨细胞退变现象进行连续观察,为进一步研究软骨退变机制实验及药物干预实验提供基础资料。方法进行大鼠软骨细胞取材并传代培养,对各代次细胞进行连续性观察。采用倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态与微结构,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA),阿力新蓝染色检测胞外基质硫酸糖氨多糖(GAG)含量和结构,反转录-聚合酶链式反应方法检测软骨细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan表达,观察软骨细胞退变。结果第四代软骨细胞出现长梭形改变,电镜下超微结构出现核固缩或水肿、细胞器减少或变形等退变表现,PCNA表达百分率明显减少(P〈0.01),GAG含量、长链分子百分比显著减少(P〈0.01),Ⅱ型胶原及Aggrecan mRNA表达显著减少(P〈0.01)。结论体外培养软骨细胞第四代出现明显功能退变。
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