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不明病因感染性疾病DNA病毒性病原检测方法的建立

作者:王火生; 张红梅; 李晓娟; 王敏; 徐六妹; ...感染性疾病病毒乙型肝炎病毒

摘要:目的建立不明病因感染性疾病DNA病毒性病原的检测方法。方法应用DNaseⅠ-非序列依赖的单引物扩增技术,将患者血清过滤后,经DNaseⅠ处理去除血清中内源DNA。Csp6.Ⅰ酶切病原DNA,加接头分子,并以接头分子为引物非特异扩增病原DNA,测序并进行序列分析。结果DNaseⅠ处理血清中内源DNA不会降解病毒DNA;非序列依赖的单引物扩增血清中外源DNA得到多个DN段;将所有PCR产物测序,序列与已知病原DNA序列完全一致。结论应用DNaseⅠ处理及非序列依赖的单引物扩增方法可以检测DNA病毒性病原。

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