作者：马健; 唐海沁; 翟志敏; 朱薇波; 李结华骨髓间充质干细胞诱导分化心肌样细胞
摘要：目的在体外将人骨髓间充质干细胞（hMSCs）进行纯化、扩增及向心肌样细胞定向诱导分化，并对诱导后的细胞进行心肌样细胞相关特性分析。方法采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs在体外经5μmoL／L5-杂氮胞苷诱导24h后继续培养8W，相差显微镜下观察细胞形态变化，免疫组化方法鉴定心肌特异性蛋白心房钠尿肽（ANP）和连接蛋白（CX43）的表达，流式细胞仪检测诱导前后细胞表面抗原（CD31、CD34、CD45、CD90）的表达情况，应用RT—PCR技术分析肌球蛋白重链（β—MHC）和肌钙蛋白T（cTnT）等相关基因在分化过程中的动态表达。结果hMSCs诱导前为纺锤形，诱导后第2天部分细胞即开始发生形变，呈球形或短棒状，1w后胞浆中颗粒增多，约20％～30％细胞呈毛刷样变化；hMSCs表面抗原CD31、CD34、CD45在诱导前后差异无统计学意义，CD90未诱导时表达呈弱阳性，诱导后明显增高（P〈0．05）；ANP和CX43在诱导前无表达，诱导后第2周开始表达且表达随时间逐渐增强，但CX43在诱导后第5周表达量开始降低。β—MHC和CTNT基因分别在诱导后第1周和第4周时表达开始增强。在第6周时均达到高峰，第8周时表达开始衰减。结论hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性，可为hMSCs临床移植治疗提供可靠、安全的细胞来源。
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