作者:赵敬国; 杨巍; 孙婷; 张巨; 李勇; 高凤彤b16细胞脱氧尿苷碘放射性同位素
摘要:目的研究^125I-脱氧尿嘧啶核苷对重组质粒pcDNAEgr-IFNγ在体外培养B16细胞中的辐射诱导表达作用。方法以脂质体介导法将pcDNAEgr-IFNγ重组质粒转染B16细胞,48h后,于培养液中加入^125I-UdR,使其终放射性浓度分别为0(空白对照)、1、5、10、20、50kBq/ml,24h后,采用ELISA法定量检测细胞上清中IFNγ。结果转染组细胞IFNγ蛋白表达随着细胞培养液中^125I-UdR浓度的增高而增高,放射性浓度为5、10、20、50kBq/ml组IFNγ的蛋白表达明显高于0kBq/ml组(P〈0.05-0.001),其中50kBq/ml组表达量最高,为0kBq/ml组的3.66倍;加入50kBq/ml ^125I-UdR后6h上清中IFNγ表达量即明显升高(P〈0.05~0.001),并随时间延长逐渐增加,照后48h达峰值,表达量为未加入^125I-UdR时的6.51倍。结论pcDNAEgr-IFNγ重组质粒在125I-UdR诱导下可有效表达IFNγ,并且其辐射诱导IFNγ基因表达增强特性具有一定的量效和时程规律。
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