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Percoll离心联合多步差异黏附法分离、纯化人睾丸精原细胞

作者:郑连文; 王晔玲; 张慕淳; 郑洪君精原细胞分离纯化

摘要:目的探讨分离、纯化人睾丸精原细胞的有效方法。方法用联合二步酶消化法获得人生殖细胞悬液,经Percoll不连续密度梯度离心,再用间隔不同时间(2、3、4h),不同次数(1、2次)差异黏附法纯化人精原细胞。结果未经纯化的精原细胞纯度为48.5%,间隔2、3、4h纯化1次所获得的精原细胞纯度分别为51.3%、59.O%、56.4%,纯度均高于未经纯化的纯度;间隔2、3、4h连续纯化2次所获精原细胞纯度分别为:57.7%、67.8%、57.8%,以间隔3h纯度最高;与间隔同样时间纯化1次精原细胞纯度相比,间隔2、3h纯化2次高于1次,间隔4h纯化2次与1次无明显差别。结论Percoll不连续密度梯度离心联合不同时间间隔差异黏附法可以有效地对人精原细胞进行分离和纯化;间隔2、3h,纯化2次高于1次;连续纯化2次时,间隔3h效果最佳。

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