作者：王岚; 杨世忠; 于志凤; 赵颖重组逆转录病毒载体转染包装滴度测定
摘要：目的包装乙型肝炎病毒（adr亚型）重组逆转录病毒并进行滴度测定，为下一步构建乙型肝炎病毒（adr亚型）转基因小鼠奠定基础。方法将乙型肝炎病毒（adr）全基因组插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了乙型肝炎（adr）重组逆转录病毒载体，鉴定正反向后，脂质体转染PA317包装细胞，G418抗性压力下进行筛选得到阳性细胞克隆，扩大培养后进行滴度测定，选取产毒率高细胞克隆株，然后扩大培养、浓缩，进行滴度测定。结果分别获得HBV（adr）全基因组正向和反向插入的重组逆转录病毒。正连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装，经筛选、浓缩后滴度为10^6CFU／ml，反连重组逆转录病毒载体经PA317细胞包装，经筛选、浓缩后滴度为10^5CFU／ml。结论PA317细胞包装了含乙型肝炎病毒（adr）全基因组的重组逆转录病毒。
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