作者：刘建巨; 吴雅臻; 李光宇; 范斌基因克隆真核表达
摘要：目的 构建真核表达质粒PcDNA3.1（＋）-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin（120～180aa）并了解其在真核细胞内的表达。方法 将带有Vasoatatin自身信号肽的Calreticulin（120～180aa）的RT-PCR产物克隆至peDNA3.1（＋）真核表达载体上，经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后，以脂质体介导法转染真核细胞COS-7，并行Western法检测。结果 成功构建了真核表达质粒PeDNA3.1（＋）-带有Vasostatin自身信号肽的Calreticulin（120～180aa），将之转染体外的真核COS-7细胞后，在其上清液中，检测到目的蛋白质。结论 该构建的质粒可在真核细胞中表达目的蛋白质，这为基因治疗视网膜新生血管类病奠定了一定基础。
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