四种刺激剂对日本血吸虫感染小鼠脾脏CD8^＋T细胞内细胞因子及表面分子CD62L的影响

作者：郑力; 胡媛; 王燕娟; 黄希宝; 沈玉娟; 徐...日本血吸虫感染细胞因子流式细胞术cd62l

摘要：目的 探讨4种常用刺激剂佛波酯（phorbol-12-myristate-13-acetate，P）、离子霉素（ionomycin，I）、布雷非德菌素A（brefeldin A，B）和莫能霉素（monensin，M）对日本血吸虫（Schistosoma japonicum）感染小鼠脾脏CD8＋ T细胞内细胞因子及表面分子CD62L的影响。 方法 21只C57BL/6雌性小鼠腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴，（20 ± 2）条/鼠。感染后第8周和第12周，分别取小鼠脾脏制备单细胞悬液，用P（50 ng/ml）＋ I（1 μmol/L）＋ M（2 μmol/L）体外刺激4 h，采用流式细胞术检测分泌γ干扰素（IFN-γ）的CD8＋ T细胞比例，同时检测细胞表面CD62L的表达情况。制备感染后4周的小鼠脾脏单细胞悬液，按I组（1 μmol/L）、P组（50 ng/ml）、B组（1 μg/ml）、M组（2 μmol/L）、P ＋ I组、P ＋ I ＋ M组、P ＋ I ＋ B组、P ＋ I ＋ M ＋ B组分组，用对应刺激剂体外刺激4 h后，利用细胞因子微球检测法检测各组培养上清中白细胞介素4（IL-4）、IL-17A、IFN-γ、IL-10、IL-1β和集落刺激因子（G-CSF）等细胞因子水平，同时用流式细胞术检测CD8＋ T细胞表面CD62L的表达情况，计算平均荧光强度（MFI）。 结果 流式细胞术检测结果显示，小鼠感染日本血吸虫后第8周和第12周，产生IFN-γ的CD8＋ T细胞比例分别降至（1.3 ± 0.8）%和（0.7 ± 0.2）%，均低于未感染对照组的（5.6 ± 0.8）%（P 〈 0.05），但两者差异无统计学意义（P 〉 0.05）。健康对照组和感染组小鼠CD8＋ T细胞表面均未检测到CD62L阳性群。不同组合刺激剂作用感染后4周，小鼠脾脏细胞培养上清细胞因子的检测结果显示，P ＋ I组和P ＋ I ＋ M组的IL-4水平分别为（177.2 ± 56.0）和（13.7 ± 2.2）pg/ml；P ＋ I组和P ＋ I ＋ M组的IL-17A浓度分别为（361.8 ± 81.3）和（33.7 ± 2.9）pg/ml；P ＋ I组和P ＋ I ＋ M组上清中的IFN-γ浓度分别为（1 534.0 ± 316.6）和（135.3 ± 16.1）pg/ml�

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