作者:白玲 谢琦 余尚扬 夏红卫 刘永明精子抗原肽抗精子抗体固相多肽合成酶联免疫吸附测定法
摘要:目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLP12和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELIA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值〉0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLP12和sP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。
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