作者：王珍; 赵昌林; 骆敏翔hsp72人脐带间充质干细胞慢病毒载体转染
摘要：目的构建含人HSP72的慢病毒,筛选获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。方法采用PCR方法从MGC fully sequenced human HSPAIA cDNA中调取HSP72基因的完整序列,利用双酶切及体外重组的方法获得pLV-HSP72-EGFP（2A）质粒,经PCR、测序方式鉴定成功后,对病毒进行包装。用病毒感染hUC-MSC,并用Puro进行抗性筛选可稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。结果构建的pLV-HSP72-EGFP（2A）测序结果与GenBank收录序列一致,包装得到pLV-HSP72-EGFP（2A）病毒,筛选获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系,ELISA方法检测显示获得的细胞株可过表达HSP72。结论构建了获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。
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