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甲醛固定的不同组织中DNA提取的比较

作者:曹晨; 刘彦军; 郑文; 薛淑莲; 杜秋香; 孑...法医病理学甲醛固定改良酚一氯仿法dna提取

摘要:目的研究运用改良酚-氯仿法从甲醛固定组织中提取DNA的方法,对比心、肝、肺、脑4种脏器DNA提取质量的优劣.从而了解哪种经甲醛固定后的组织易于得到质量较为可靠的DNA,以达到对DNA扩增及后续研究的目的。方法选取甲醛固定标本脏器各14例,以蛋白酶K消化和酚-氯仿法提取检材中DNA,对所得DNA质量以紫外分光光度计、PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析进行结果判断。结果心、肝、肺、脑4种组织所提DNA的OD260/0D280比值分别为(1.842±0.380)、(1.861±0.076)、(1.387±0.113)、(1.428±0.087)。每100毫克组织中DNA含量(P,g)分别为(0.944±0.530)、(1.096±0.544)、(0.348±0.273)、(0.601±0.238)。PCR扩增后经琼脂糖凝胶电泳分析显示.心肌和肝脏组织的条带清晰度高于肺脏和脑组织。结论经甲醛浸泡固定的心肌组织和肝脏组织.运用改良酚-氯仿法所得DNA质量较为可靠,可以用于后续研究。

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