作者：顾蓓; 刘玉琴; 张永鹏; 张宏; 王春景; 苏...星状胶质细胞gafp大鼠
摘要：目的：探索建立视神经星状胶质细胞培养的最佳方法，观察该细胞体外水解酶表达情况。方法：分别取不同年龄WISTAR大鼠（出生4d、7d、成年）的视神经，利用胰蛋白酶加EDTA、胶原酶、木瓜酶、胰蛋白酶加胶原酶等不同方法消化。分别接种在0．2％明胶、鼠尾胶、多聚赖氨酸包被的培养瓶中，进行原代培养，观察细胞生长状况。利用免疫组化鉴定分离培养的细胞。连续传代观察其衰老情况。利用水解空斑法观察其水解酶表达。结果：几种方法均可见细胞生长，年龄4、7d大鼠视神经要比成年大鼠视神经胶质细胞培养成功率高，利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化要比其他消化方法细胞损失小。速度快，细胞成活率高。培养细胞呈典型星状胶质细胞形态，GAFP呈阳性。常规3d传代一次，可传代40次。胶质细胞在蛋白膜上可形成明显的水解空斑。结论：利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化法，从新生鼠取材，可成功培养视神经星状胶质细胞，体外可传代40代。该细胞在体外可分泌蛋白水解酶。
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