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波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中10个活性成分的含量

作者:谷江华; 石征蓉; 杨秀青; 袁强华; 朱聪; ...水蛭蛴螬化瘀片丹参素钠丹酚酸b黄芩素汉黄芩素黄芩苷汉黄芩苷甘草酸铵延胡索乙素芍药苷高效液相色谱法三元流动相波长切换法

摘要:目的:建立多波长切换HPLC法同时测定水蛭蛴螬化瘀片中丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷10个成分的含量。方法:采用岛津Insertsustain C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%醋酸水溶液-甲醇-乙腈为流动相梯度洗脱,DAD检测器,检测波长为280 nm(0~20 min,33~36 min,38.8~42 min检测丹参素钠、延胡索乙素、黄芩苷),230 nm(20~29 min,检测芍药苷),254 nm(29~33 min,检测异鼠李素-3-O-新橙皮苷),252 nm(62~70 min检测甘草酸铵),286 nm(36~38.8 min检测丹酚酸B),274 nm(42~48 min,70~80 min检测汉黄芩苷、汉黄芩素),276 nm(48~62 min,检测黄芩素),流速1.0 mL·min~(-1),柱温为25℃。结果:通过1次进样,同时测定了上述10个成分的含量,丹参素钠、丹酚酸B、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、甘草酸铵、延胡索乙素、芍药苷的进样质量浓度分别在6.32~158μg·mL~(-1)(r=0.999 8)、53.4~1 336μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、1.51~37.8μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、0.888~22.2μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、18.6~465μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、7.92~198μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、2.14~53.6μg·mL~(-1)(r=0.999 8)、3.30~82.6μg·mL~(-1)(r=1.000 0)、1.12~28.0μg·mL~(-1)(r=0.999 9)、38.5~962μg·mL~(-1)(r=0.999 9)与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为97.0%(RSD=1.6%)、99.1%(RSD=1.4%)、99.0%(RSD=1.4%)、98.1%(RSD=1.6%)、99.2%(RSD=0.98%)、100.2%(RSD=1.8%)、98.7%(RSD=2.6%)、100.4%(RSD=1.7%)、100.2%(RSD=3.0%)、100.5%(RSD=2.2%);3批中试样品中上述10个成分含量测定结果依次为2.112~2.119 mg·g~(-1)、15.642~15.648 mg·g~(-1)、1.558~1.568 mg·g~(-1)、0.553~0.568 mg·g~(-1)、16.515~16.527 mg·g~(-1)、4.412~4.423 mg·g~(-1)、0.5

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