作者：刘朝; 唐耀冰; 杨延芳视网膜母细胞瘤上调pten促癌作用
摘要：目的探讨mi R-130b在人视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）中的作用,并阐明其分子机制。设计实验研究。研究对象人RB癌组织及细胞系。方法采用荧光定量PCR检测40例RB患者癌组织及相应癌旁组织中mi R-130b的表达情况。采用噻唑蓝比色法（MTT）和蛋白印迹法检测mi R-130b对RB细胞增殖及凋亡能力的影响。通过生物信息学分析预测mi R-130b的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验和蛋白印迹验证。主要指标细胞生存率、细胞凋亡率及荧光素酶活性。结果mi R-130b在人RB癌组织的表达量明显高于配对的癌旁组织（P=0.023）;mi R-130b在HXO-Rb44（P=0.008）和Y79（P=0.012）细胞系中的表达量亦高于正常视网膜血管内皮细胞（ACBRI-181）。体外功能实验发现,转染mi R-130b抑制物可显著抑制HXO-Rb44（P=0.004）和Y79（P=0.001）细胞的增殖,并增加HXO-Rb44（P=0.011）和Y79（P=0.027）细胞凋亡。生物信息学分析发现＂与张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶＂（phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN）是mi R-130b的靶基因。双荧光素酶报告基因试验和蛋白印迹结果显示,mi R-130b可直接与PTEN m NRA 3’-非编码区结合,并抑制其翻译,并最终降低HXO-Rb44（P=0.038）和Y79（P=0.025）细胞中PTEN蛋白表达水平。结论 mi R-130b在RB组织表达上调,mi R-130b通过下调PTEN的表达可促进RB细胞的增殖并减少其凋亡,提示mi R-130b可作为RB基因治疗的一个新的分子靶点。
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