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云南紫稻细胞质雄性不育系和保持系线粒体基因组BAC文库的构建

作者:严志祥 余金洪 丁毅细胞质雄性不育线粒体bac文库pcr筛选

摘要:以云南紫稻细胞质无花粉型水稻樱香不育系和保持系为材料,构建了不育系和保持系的线粒体基因组BAC文库.每个文库均保存2304个菌落,外源插入片段介于10~20kb之间.将两个文库的2304个克隆分别集中于96孔板中,根据已发表的水稻线粒体序列对atp6、atp9、cob、cox2等4个基因设计特定引物,对96孔板中的菌落进行了PCR鉴定,均能筛选得到阳性克隆,通过对96孔板中阳性克隆的位置进行推导,可以得到文库中含有相应基因克隆的大致位置及数目.PCR筛选结果显示两个文库均包含用于检测的目的线粒体基因,说明文库典型性良好,并且PCR法用于文库基因筛选具有快速简便的优点.

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武汉大学学报·理学版

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