蛙虹彩病毒cop基因的克隆表达及亚细胞定位

作者：柯飞; 赵哲; 张奇亚蛙虹彩病毒凋亡相关结构域亚细胞定位

摘要：从蛙虹彩病毒（Rana grylio virus,RGV）基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop （ Caspase recruitment domain only protein, COP）基因的全部编码区，成功构建了重组表达载体，进行了原核表达，并在鲤鱼上皮瘤细胞 （Epithelioma papulosum cyprini , EPC）中进行了亚细胞定位．序列分析表明，RGV cop基因全长288bp，编码一个长为95aa，分子量为10．4×10^3的推定蛋白．二级结构预测表明其含有5个α螺旋．同源性比对分析显示，RGV cop与其他6株虹彩病毒及人类cop相关蛋白同源性最高为94％，最低为33％．重组原核表达质粒pET28a—COP转化大肠杆菌BL21后，经IPTG诱导表达，获得一条约14×10^3的融合蛋白．重组真核表达质粒pEGFPN3-COP转染EPC细胞，经DAPI染色后，在荧光显微镜下观察显示重组蛋白在整个细胞中均有分布．

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