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推定的BB0462蛋白增强oppAⅤ启动子的转录活性

作者:王行国; 尹姣; 徐娴bb0462蛋白oppav上游调控区凝胶阻滞分析转录活化因子

摘要:Borrelia burgdorferi基因组中BB0462 ORF编码一种由110个氨基酸组成的未知功能BB0462蛋白.使用推定的氨基酸序列在蛋白库中进行Blast比对以及推定蛋白的二级结构预测的结果都显示BB0462蛋白与YhaB家族的蛋白类似.共转化后β-半乳糖苷酶活性分析发现BB0462蛋白增强了B.burgdorferi lp54质粒携带的oppAⅤ上游调控区的转录活性,而对其他4个oppAⅠ~Ⅳ上游调控区调控区的转录活性没有影响.利用纯化的BB0462融合蛋白在体外分别与oppAⅠ~Ⅴ调控区DN段进行凝胶阻滞分析,发现BB0462蛋白仅与邻近oppAⅤ基因转录起始点的一段409bp上游调控区DNA结合.用未标记的oppAⅤ上游调控区DNA与DIG-标记的oppAⅤ上游调控区DNA竞争BB0462蛋白,使凝胶上的DNA迁移阻滞带完全消失.β-半乳糖苷酶活性分析和凝胶阻滞分析表明BB0462蛋白在oppAⅤ基因表达的转录调控中可能起重要作用.

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