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顺式高尔基体蛋白GM130影响小鼠卵母细胞减数不对称分裂的研究

作者:张春晖 钱卫平 孙洪梅 孟繁华顺式高尔基体蛋白gm130小鼠卵母细胞减数不对称分裂纺锤体

摘要:目的 确定顺式高尔基体蛋白(GM130)对小鼠卵母细胞纺锤体迁移及减数不对称分裂的影响. 方法 免疫荧光法检测GM130在小鼠卵母细胞的定位,活细胞工作站延时拍摄系统捕捉纺锤体在降调GM130表达后的的动态变化.结果 降调GM130的表达后,第一极体排出率下降,在排出的极体中,大极体的比率升高;但对微丝网络及微丝帽的影响不明显.向卵母细胞内注射β5-tubulin-GFP mRNA和GM130特定的寡聚核苷酸(morpholino,MO)的混合物后,用活细胞工作站延时拍摄系统证实了降调GM130会影响卵母细胞纺锤体的迁移,纺锤体单极拉长,并能与该侧的皮质接触,产生胞质分裂环,导致大极体排出.若拉长的纺锤体尚不能与皮质接触,则细胞阻滞在分裂中期Ⅰ(MI期),没有极体排出.另外,降调GM130的表达也会影响磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(p-MEK1/2)在纺锤体极的定位,用丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)的抑制剂U0126处理MI期的卵母细胞则发现GM130不再在纺锤体两极聚集,而是散在分布于胞浆. 结论 GM130可能参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在小鼠卵母细胞纺锤体迁移及不对称分裂中起重要作用.

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