作者：王增艳 何方方 徐苓胚胎玻璃化冷冻小鼠基因印记
摘要：目的研究胚胎玻璃化冷冻对胎鼠及胎盘H19基因印记控制区（DMD）甲基化状态的影响。方法以正常生育期雌雄鼠合笼获得的14d胎龄的胎鼠及胎盘为对照组；以促排卵、体外受精、体外培养及胚胎移植后获得14d胎龄的胎鼠及胎盘作为体外受精组；冷冻组与体外受精组不同的是体外培养的胚胎经玻璃化冷冻复苏后再移植。对获得的胎鼠及胎盘提取基因组DNA，经亚硫酸盐变性后克隆测序分析H19DMD的甲基化状态。结果体外受精组胎鼠H19DMD区有甲基化丢失，胚胎冷冻组中丢失更严重；胎盘中也存在明显的甲基化丢失，但冷冻组与体外受精组相比无明显改变。结论本研究提示小鼠胚胎的玻璃化冷冻过程会加重体外操作等引起的植入后胎鼠H19DMD甲基化丢失；对胎盘H19DMD甲基化状态无明显影响。
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