作者：赵淑华 赵凡 郑晶莹 高丽芳 赵雪俭卵巢癌rna干扰stat3凋亡
摘要：目的 探讨RNA干扰沉默STAT3基因表达对人卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用.方法针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA（siRNA）的DNA模板,构建重组质粒（pSilencer 1.0-U6-siRNA-STAT3）,转染SKOV3细胞进行体外研究;采用Western blot、实时聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫细胞化学技术检测重组质粒对STAT3基因表达的作用;MTT法检测重组质粒对SKOV3细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）及吖啶橙染色检测重组质粒诱导的细胞凋亡.结果 （1）免疫组织化学技术证实卵巢癌细胞株SKOV3及癌组织中STAT3呈高表达;（2）成功构建pSilencer 1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒,并成功转染SKOV3细胞;（3）MTT法证实重组质粒抑制SKOV3细胞的增殖,流式细胞技术证明重组质粒诱导细胞凋亡;（4）RT-PCR与Western blot分析表明,重组质粒在mRNA及蛋白质水平特异的抑制STAT3的表达;（5）STAT3基因表达的下调抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.结论 pSilencer 1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒可抑制STAT3在人卵巢癌细胞SKOV3中的表达,并抑制肿瘤细胞的生长,促进其凋亡.
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