作者:胡廉 黄翔 田永红 熊承良抑制素启动子睾丸
摘要:目的 克隆大鼠抑制素α亚基(Inhα)启动子,建立报告基因表达系统,初步分析其在睾丸支持细胞中的转录活性.方法 采用降落聚合酶链反应(touch-down PCR)法,从大鼠睾丸组织DNA中扩增三段不同长度的Inhα启动子序列(395、606、775 bp),克隆入载体pEGFP-N1,构建绿色荧光蛋白的报告基因系统,转染大鼠睾丸支持细胞,荧光显微镜观察绿色荧光表达情况.结果 成功构建带有Inhα启动子的绿色荧光蛋白报告基因表达系统.三段重组质粒转染支持细胞后均可见绿色荧光表达,但荧光量和强度均弱于CMV启动子,其中395片段最为显著.结论 Inhα启动子在睾丸支持细胞中的转录活性弱于CMV启动子,可能与启动子本身的序列结构有关.
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