作者：陈梨萍; 李科; 郑振优; 宋绪华; 李雷; 赵...cyclind1人角膜上皮细胞角膜wntl
摘要：目的：探讨Wntl蛋白对人角膜上皮细胞CyclinD1蛋白表达的影响及其相关分子机制。方法：人角膜上皮细胞经复苏、培养，连续传代2次后共培养12个T25细胞培养瓶，4个培养瓶一组，共3组，分别加入25ng／mL的重组人Wnt1蛋白和50ng／mL的重组人Wnt1蛋白，一组不加入重组人Wntl蛋白作为对照，于不同时间点（6、24、48和72h）各取一个T25培养瓶的细胞，计算各组角膜上皮细胞总数并采用Westernblot方法检测角膜上皮细胞中CyclinD1蛋白的表达情况。结果：对照组cyclinD1蛋白的表达在0～d8h内随着时间的延长呈现逐步降低的趋势，在48h达到最低状态，在72h有所提高。加入Wntl后6h，25ng／mL组未检测到CyclinD1蛋白表达，50ng／mL组CyclinD1蛋白表达有所提高。在24，48和72h时间点，25ng／mL组和50ng／mL组CyclinD1蛋白表达均提高，48h达到最高峰，72h有所回落。添加Wntl后与对照组比较，25ng／mL组及50ng／mL组角膜上皮细胞生长速度均加快，但在6、24及48h时间点差异无显著性，在72h差异有显著性。结论：Wntl蛋白的刺激可在一定时间范围内增强人角膜上皮细胞cvclinD1的表达，且与Wntl蛋白量呈正相关。CyelinD1的表达强弱，在角膜上皮损伤修复及其细胞增殖分化过程中可能起重要作用。
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