作者:伊力亚尔·尼加提 王珊珊 王俊坡 商瑜 何...icf45蛋白纯化单克隆抗体elisa
摘要:本研究利用RT-PCR的方法扩增出人ICF45基因片段并将其构建至原核表达载体pET-30a,随后将此质粒转化,用IPTG诱导大量表达ICF45蛋白.利用纯化的ICF45蛋白免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,采用间接酶联免疫ELISA筛选阳性克隆,最终获得了2株分泌ICF45抗体的杂交瘤细胞.Western Blot、免疫荧光和免疫组化结果均显示其分泌的抗体能特异性识别ICF45蛋白,并且该抗体灵敏度高、特异性强.本研究获得的ICF45单克隆抗体,为深入阐明ICF45在人类细胞周期调控和肿瘤发生发展中的作用机制提供了重要的工具.
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