作者：赵雪纯; 李建毅; 周晓芳; 刘雪芹神经干细胞蛋白酶体活性氧小鼠
摘要：目的：探讨蛋白酶体活性对小鼠神经干细胞（NSCs）活性氧（ROS）水平和增殖能力的影响,寻求维持NSCs活力的有效方法。方法：分离培养新生（P0）和成年（P90）小鼠室管膜下区（SVZ）神经干细胞。比较P0和P90 NSCs成球数量和增殖能力,荧光酶标仪检测蛋白酶体活性,DCFH-DA法测定ROS水平。应用蛋白酶体抑制剂MG132和激活剂18α-GA分别作用于P0和P90 NSCs,CCK-8法、DCFH-DA法和JC-1染色检测蛋白酶体活性改变对NSCs增殖能力、ROS水平和线粒体膜电位的影响。结果：P90 NSCs神经球直径和数量较P0明显减少,增殖活性较P0 NSCs明显下降（P〈0.001）。此外,P90 NSCs蛋白酶体活性较P0 NSCs降低0.55±0.03（P〈0.05）,但ROS水平却较P0 NSCs升高13.25±0.12倍（P〈0.001）。MG132作用后P0 NSCs ROS水平呈浓度依赖性升高,其中10μmol/L组较对照组显著升高131%±8.4%（P〈0.001）,增殖活性却降低54.4%±7.8%（P〈0.001）;MG132组NSCs线粒体膜电位较对照组下降。相反,18α-GA作用后P90 NSCs ROS水平呈浓度依赖性降低,其中6和8μg/ml组分别下降2.77±0.20和2.78±0.32（P〈0.01）,增殖活性却是对照组的3.76和5倍（P〈0.001）;18α-GA组NSCs线粒体膜电位较对照组升高。结论：蛋白酶体活性与NSCs ROS水平密切相关,激活蛋白酶体活性可减少ROS对成年NSCs线粒体功能的影响,提高NSCs增殖活力。
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