蒙古羊脂肪来源间充质干细胞的分离培养及体外分化诱导

作者：高晋芳 刘宗正 韦林盖 周欢敏 张焱如 曹...蒙古羊脂肪间充质干细胞脂肪组织诱导分化

摘要：建立蒙古羊脂肪间充质干细胞（Adipose-derived mesenchymal stem ceils，ADSCs）体外分离培养方法，并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用I型胶原酶将蒙古羊脂肪组织消化后，离心得到单核细胞，并进行传代培养，测定其倍增时间。采用甲苯胺蓝染色和PAS染色法以及RT-PCR法，分别从组织学水平和基因水平对第3代蒙古羊ADSCs向成神经和成心肌的诱导分化情况进行鉴定。结果显示，分离得到的脂肪间充质干细胞大小较为均匀，呈梭形或星形的成纤维细胞样；传代接种后第4天细胞进入指数生长期，第8天进入平台期，前10代ADSCs的倍增时间平均为34．1h；经成神经诱导后，细胞呈胶质细胞状，RT-PCR检测EN02和GFAP基因表达呈阳性；心肌诱导后，细胞体积增大，多呈长梭形，平行排列，诱导15d后部分细胞可见类肌管样结构，PAS染色可见明显的糖原沉积，RT-PCR检测NKX2．5和GATA-4基因表达呈阳性。表明获得的蒙古羊ADSCs具有多向分化潜能。

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