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少突胶质细胞体外培养、纯化、鉴定及缺氧模型建立

作者:杨晖 王玮少突胶质细胞细胞培养细胞分离缺氧

摘要:目的观察体外培养少突胶质细胞的增殖、分化及其生物学特性;探讨获得细胞纯度较高的实验方法及如何建立少突胶质细胞的缺氧培养模型。方法1.取新生SD大鼠脑皮质进行体外培养,采用两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养,倒置显微镜结合免疫荧光染色法鉴定细胞种类并分析纯度。2.缺氧联合低糖培养建立细胞体外缺氧培养模型,相差显微镜观察细胞的形态学变化。结果1.获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。少突胶质前体细胞祖细胞A285荧光标记阳性,成熟少突胶质细胞半乳糖脑苷脂阳性。2.缺氧培养2小时细胞变化不明显,但缺氧培养6小时,细胞存活率明显下降,并且随着缺氧时间延长存活细胞更少,凋亡细胞更多,至缺氧培养10小时,大多数细胞破碎。结论1.两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养可获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。2.低糖联合缺氧培养模型可以建立可行的少突胶质细胞体外缺氧模型。

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四川解剖学

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