作者：许秀娥 徐宏伟 葛银林 张金玉 冯翠萍rna干扰血管内皮生长因子受体2甲基化细胞凋亡
摘要：目的探讨体外水平利用化学修饰的小干扰RNA（siRNA）敲减含激酶插入区受体（KDR）基因治疗乳癌的可行性和特异性。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000TM作为转染试剂,将针对人KDR基因的siRNA转染人乳癌细胞株MCF-7敲减KDR基因的表达。通过Hoechst 33258染色观察MCF-7细胞的凋亡情况;采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测NES1基因和RUNX3基因甲基化状态和mRNA的转录水平。结果靶向KDR的siRNA转染MCF-7细胞后可诱导细胞凋亡,NES1基因和RUNX3基因甲基化程度降低,出现非甲基化条带,同时mRNA表达上调。结论KDR siRNA在体外能逆转MCF-7细胞的NES1基因和RUNX3基因甲基化,并诱导细胞凋亡。
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