作者：王瑶 韩琳 李长贵人尿酸盐转运子1基因克隆分子内含子高尿酸血症
摘要：目的构建pcDNA3.1（-）/hURAT1真核表达重组体。方法提取人全血基因组DNA,进行PCR扩增,将纯化的扩增产物与表达载体pcDNA3.1（-）连接后转化DH5α感受态细胞。重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后,应用核苷酸序列测定方法进行鉴定。结果PCR扩增得到hURAT1第2外显子至第5内含子长1 958 bp的基因片段。该片段与表达载体pcDNA3.1（-）连接后转化DH5α感受态细胞。重组质粒经酶切和核苷酸序列测定方法鉴定,证实hURAT 1片段插入序列和方向正确。结论hURAT 1基因组DN段插入真核表达载体pcDNA3.1（-）的序列和方向正确,可用于后续基因功能研究,尤其是编码序列和内含子序列变异的功能研究。
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