作者：张红玲 陈爱平 杨蕊蕊卵巢肿瘤受体表皮生长因子rna干扰细胞凋亡
摘要：目的探讨RNA干扰（RNAi）对卵巢癌细胞表皮生长因子受体（EGFR）基因表达的影响及其效应。方法体外合成EGFR的DNA模板序列和pSilencer 2．1-U6neo质粒构建编码．shRNA的表达载体，应用脂质体Lipofectamine2000将其转染到人卵巢癌Skov-3细胞，采用半定量RT—PCR、免疫细胞化学技术检测转染前后Sk—ov-3细胞EGFR基因的变化；采用Annexin V／PI双染色标记的流式细胞仪检测siRNA诱导的细胞凋亡，PI染色检测细胞周期阻滞。结果成功构建pSilencer—EGFR短发卡状siRNA真核表达载体；靶向EGFR的序列特异性的siRNA可以有效抑制Skov-3细胞EGFR基因的表达；流式细胞分析显示，Skov-3细胞凋亡率明显增加，细胞周期出现明显的G0／G1期阻滞。结论RNAi沉默EGFR表达可以诱导卵巢癌Skov-3细胞凋亡，并使卵巢癌Skov-3细胞停滞在G0／G1期，RNAi可作为研究卵巢癌发生发展机制和基因治疗的有效工具。
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