作者：石学香 高美华 臧金林rna双链抗原cd59转染逆转录病毒载体
摘要：目的利用siRNA表达载体法构建并筛选携带针对CD59基因pSUPERretroRNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆。方法用DNA重组技术，将3条60bp能转录产生靶向CD59小发夹RNA（shRNA）的寡核苷酸序列定向克隆人逆转录病毒载体pSUPERretro，脂质体法转染包装细胞系Phoenix A，建立产生逆转录病毒的细胞克隆。结果重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后测序序列正确；重组载体转染包装细胞，可表达绿色荧光蛋白，表明包装成功。结论特异性沉默CD59基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体以及稳定产毒的细胞系构建成功，为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础，可望为肿瘤治疗开辟新途径。
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