作者：殷广洁 罗兵 王言奎rna干扰锌指乳头状瘤病毒人e6基因宫颈肿瘤hela细胞
摘要：目的探讨靶向HPV18 E6基因不同锌指区编码序列的siRNA对HeLa细胞的影响。方法分别设计靶向E6蛋白不同锌指区编码序列的两对siRNA,脂质体法转染HeLa细胞。半定量RT-PCR检测E6 mRNA转录表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测细胞增殖活性;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡情况。结果与siRNASCR转染组比较,RT-PCR结果显示,siRNA1和siRNA2转染后E6表达水平明显降低（F=8.709,P〈0.05）,且siRNA2组较siRNA1组下降更为显著（t=3.61,P〈0.05）。MTT结果提示,2对siRNA转染后48 h和72 h的细胞增殖活性均明显下降（F=60.583、102.421,P〈0.05）,siRNA2组较siRNA1组下降更为明显（t=4.717、7.932,P〈0.01）;2对siRNA转染后均未检测到明显的细胞凋亡。结论靶向锌指2区编码序列的siRNA抑制E6基因表达和HeLa细胞增殖的效果更好,锌指2区可能是使HeLa细胞发生恶性转化并使其增殖失调控的关键区域。
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