作者：张海宁; 王英振; 王湘达; 吕成昱; 刘金钊...半月板胫骨成纤维细胞生长因子2
摘要：目的分区培养成体半月板细胞，观察不同区域的半月板细胞生长特性以及生长因子对其的影响。方法无菌切取1月龄雄性山羊双后肢半月板，剪碎后D-Hanks液漂洗，Ⅱ型胶原酶振荡消化，滤网过滤后离心收集细胞。接种6孔细胞培养板，每孔1×10^5个，37℃、体积分数为0．05的CO2、饱和湿度培养。绘制生长曲线，台盼蓝染色测细胞活力。细胞爬片行苏木精一伊红及Ⅱ型胶原免疫组化染色。RT-PCR检测aggrecan的表达。用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果山羊成体半月板细胞自36h后开始贴壁，外侧区细胞以长梭形为主，内侧区以多角形为主，混合区细胞形态为混合型。台盼蓝拒染试验测细胞活力约为92％。群体倍增时间约为47．4h。加入人胰岛素样生长因子Ⅰ和碱性成纤维细胞生长因子后细胞增殖加快，多角形细胞增多；细胞爬片行Ⅱ型胶原免疫组化染色证实在转染细胞胞浆中有棕黄色颗粒。RT-PCR检测结果显示目的条带与aggrecan的预期大小相符。流式细胞仪检测加入生长因子后的半月板细胞S期比例增加，而G1期细胞减少。结论不同区域的半月板细胞有形态差异。加入生长因子后可促进其生长、增殖。
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