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^88Arg IL-2的克隆构建及原核表达

作者:孟林; 刘明军; 王斌; 钱冬萌白细胞介素2基因突变原核表达蛋白质印迹法mtt比色法

摘要:目的 构建^88ArgIL-2的重组克隆,并在大肠杆菌中表达。方法 根据天然IL-2的基因序列设计含目的突变位点的引物,经PCR定点诱变技术获得^88ArgIL-2的重组克隆,插入原核表达质粒pGEX4T-2中.经IPTG诱导在大肠杆菌DH5α中表达^88ArgIL-2与GST的融合蛋白。结果 所表达的蛋白相对分子质量约为42000。Western blot检测结果表明,该蛋白具有与亲本IL-2相同的抗原性。MTT比色结果表明,^88ArgIL-2可促使IL-2依赖细胞株CTLL-2生长,具有与亲本IL-2相近的生物学活性。结论 成功构建了^88ArgIL-2的重组克隆,在原核表达系统中高效表达出融合蛋白,并且具有生物学活性。

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青岛大学医学院学报

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