作者:曾艳霞; 葛银林; 李馨; 耿芳宋碱性磷酸酶盐酸胍复性变性
摘要:目的 观测人胎盘碱性磷酸酶(HPAP)在盐酸胍变性和复性过程中构象与活力的变化,探讨其折叠机制。方法 应用荧光光度法检测HPAP构象变化,用分光光度法检测其活力的变化。结果 低浓度的盐酸胍(〈0.5mol/L)使酶的荧光强度略有下降,最大发射波长不变,仍为340nm,酶活力增强;随盐酸胍浓度的增加,其荧光强度升高,最大发射波长明显红移,酶活力迅速下降;当盐酸胍浓度增至3.0mol/L时,最大发射波长停止于365nm,酶活力丧失,但其荧光强度在胍浓度增至5.0mol/L时才停止变化。结论 HPAP在变性过程中存在三态;变性中间态酶可完全复性,而变性态酶仅部分复性,且与复性条件有关。
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