作者:张义旋; 王磊牙髓干细胞分化增殖发状分裂相关增强子1
摘要:目的探讨发状分裂相关增强子1(Hes1)对牙髓干细胞增殖及对成牙本质分化相关蛋白的表达影响。方法分离人牙髓干细胞,细胞转染小干扰RNA对照(siRNA control)和Hes1小干扰RNA(siRNA Hes1)分别记为阴性组和干扰组,同时以没有转染的细胞为对照组。RT-PCR和Western blot检测转染效果,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blot检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)蛋白表达。结果与对照组相比,阴性组Hes1 mRNA和蛋白水平无显著差异;干扰组Hes1 mRNA和蛋白水平明显降低;与对照组相比,阴性组细胞存活率无显著差异(P=0.999),干扰组细胞存活率明显降低(P=0.026)。与对照组相比,阴性组ALP活性无显著差异(P=0.800),干扰组ALP活性明显升高(P=0.004)。与对照组相比,阴性组DSPP、OCN水平无显著差异(t_(DSPP)=0.408,P_(DSPP)=0.704,t_(OCN)=0.271,P_(OCN)=0.800),干扰组DSPP、OCN水平明显升高(t_(DSPP)=5.543,P_(DSPP)=0.005,t_(OCN)=10.063,P_(OCN)=0.001)。结论干扰Hes1表达能够抑制牙髓干细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性,促进分化相关蛋白表达。
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