作者:宋欧获; 秦书俭; 於绍龙麦角甾苷骨髓基质细胞增殖成骨分化
摘要:目的探讨麦角甾苷对大鼠骨髓基质细胞增殖和成骨分化的影响及机制。方法密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓基质细胞并鉴定,细胞随机分为4组,分别以终浓度为100μmol/L(A组)、50μmol/L(B组)、25μmol/L(C组)和0μmol/L(D组)的麦角甾苷干预培养。24h、48h及72h后采用CCK-8法检测细胞增殖情况。于干预培养24h、48h和96h后进行碱性磷酸酶活性检测;72h后进行碱性磷酸酶染色。Westernblot及Realtime—PCR分别检测成骨相关蛋白及基因表达情况。结果加药干预24h和48h后,麦角甾苷对骨髓基质细胞增殖情况并无显著影响(P〉0.05);加药72h后,A组吸光度值降低(P〈O.05)。A~C三组碱性磷酸酶表达量均较D组有所增高(P〈0.05),B组及C组较明显。Western Blot及Realtime—PCR检测结果显示A组、B组及C组BMP2、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osterix成骨相关蛋白及对应基因表达水平均高于D组(P〈0.05),而各加药组间差异不明显(P〉0.05)。结论麦角甾苷对体外培养的大鼠骨髓基质细胞增殖并无显著影响,并可以通过BMP2-Smads—Runx2-Osterix通路促进BMSCs成骨分化。
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