作者：郑晓文; 饶品彬; 蔡晔; 杨宗歧; 姜永厚evagreen实时荧光定量pcr熔解曲线分析检测
摘要：目前，猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）已成为全球范围内影响较广的猪类重要疾病之一，因此建立快速、有效的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测技术成为预防和控制PRRS传播的关键。在序列分析的基础上，设计特异性引物，建立基于熔解曲线分析的EvaGreen实时荧光定量PCR检测PRRSV方法。该方法能够特异性扩增PRRSV，并用经熔解曲线分析产生特异性的熔解峰，而非靶标病毒未产生非特异性扩增；PRRSV的检测灵敏度可达50copies／μL；批内、批间重复试验中变异系数均在2％以内；对118份临床样品进行检测，阳性率为31．4％，与普通PCR检测结果相符率为100％。结果表明，建立的EvaGreen实时荧光定量PCR检测PRRSV方法具有较高的特异性、灵敏度和良好的重复性，可用于临床PRRSV感染的早期诊断及分子流行病学调查。
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