作者:孙诗雯; 张笑笛; 宋宇白藜芦醇生物信息学基因克隆blast2go
摘要:利用RT—PCR技术从巨峰葡萄中克隆获得RS基因的全长cDNA序列,并利用农杆菌侵染法转化黄芪。试验结果表明:经VectorNTI 11.0软件分析克隆获得的尺S基因全长序列长度为1241bp,并带14bp长度的poly(A)尾巴,包含930bp的开放读码框(ORF),编码1个含310个氨基酸残基的蛋白质。生物信息学分析结果表明:RS基因编码白藜芦醇合成酶,对Rs基因全长序列进行蛋白质结构域分析,证明该基因具有查尔酮合成酶N端保守结构域,其长度为225个氨基酸。对黄芪进行遗传转化结果表明:获得了3棵黄芪转基因阳性植株,通过DNA、RNA以及蛋白质水平证明JRs基因已经完全整合到黄芪基因组中并表达。
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