柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因的克隆及分析

作者：仇保丰; 董蓉莲; 宋鸿雁; 顾炳泉; 景瑾; ...柔嫩艾美耳球虫s3a基因克隆分析

摘要：根据GenBank中收录的柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从纯化的柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子中提取总RNA,然后应用RT-PCR技术扩增出约810bp的产物,将其连入pMD18-T载体,经双酶切和PCR鉴定正确后,进一步进行DNA序列测定.将本研究测序结果与GenBank收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因进行比对,发现两序列间有6个碱基发生突变,其中3个为无义突变,其余为有义突变,同源性为979%;本研究扩增的S3a基因包含了一个全长795bp的完整开放阅读框（ORF）,编码264个氨基酸,蛋白分子量约为29.9KD,ORF碱基同源性为99.0%,推导氨基酸序列同源性为98.1%.将本研究克隆的核糖体蛋白S3a基因与GenBank中收录的人和哺乳动物、植物、真菌、禽鸟等共15种真核生物的核糖体蛋白S3a基因进行比对发现,虽然本研究克隆和GenBank中收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因之间同源性最高,但是两者却与硕大利什曼原虫和布氏锥虫这2种原虫的S3a基因同源性较低,反而与禽鸟S3a基因的同源性较高.

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