作者:薛涛涛; 边金; 伍陆; 赵秀娟; 崔向军; 蔡...酿酒酵母h3k56a突变菌组蛋白修饰两步替换法同源重组高盐环境高温环境抗逆机制
摘要:组蛋白修饰,例如甲基化、乙酰化等修饰对基因表达和细胞生长至关重要.为揭示组蛋白H3第56位赖氨酸(K)修饰对酵母细胞生长的重要性,构建H3K56定点突变为丙氨酸(A)的组蛋白突变株H3K56A,并对其在高温、高盐等条件下的生长状况进行初步检测.根据酵母同源重组的原理,采用两步替换法构建H3K56A突变菌株,用分光光度法测定突变菌株的生长曲线,并分别在高盐、高温条件下检测突变体的表型.结果表明,酿酒酵母组蛋白H3K56A突变菌株构建成功,其生长曲线与野生型无明显差异;H3K56A突变株对高温、高盐条件均较敏感,且在高盐条件下,菌体生长缓慢、菌落偏小,表明组蛋白H3K56位点的修饰可能与酿酒酵母抗高盐、高温机制有关.
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