作者：赵刚; 刘微微; 高伟玮; 马洁骨髓间充质干细胞人脐带间充质干细胞人胎盘间充质干细胞骨组织工程成骨分化
摘要：目的比较成人骨髓间充质干细胞（BMSCs）、人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）和人胎盘间充质干细胞（P-MSCs）的成骨能力。方法用含10%胎牛血清的DMEM/Ham＇s F-12培养液培养3种MSCs,CCK8法检测增殖能力,流式细胞仪鉴定3种细胞。碱性磷酸酶（ALP）和茜素红染色观察细胞经成骨诱导后成骨分化蛋白-ALP的分泌和矿化钙结节的沉积。实时荧光定量PCR（RT-q PCR）法检测MSCs骨再生相关基因的表达。Western blot方法检测MSCs成骨再生相关基因的蛋白表达。结果 MSCs在第3天进入对数增殖期。3种细胞的表面标志物阳性率：CD44、CD90和CD105均高于98%。3种MSCs成骨诱导9 d时,3种MSCs的实验组均表达大量成骨分化蛋白-ALP,成骨诱导18 d时3种MSCs均呈现较好的矿化能力;3种MSCs成骨诱导9 d时,实验组RUNX2和ALP基因显著性高表达（P〈0.05）,成骨诱导18 d时,实验组RUNX2和骨钙素（OCN）亦显著性高表达（P〈0.05）;3种MSCs成骨诱导9 d时,实验组均检测到RUNX2和ALP的蛋白表达;成骨诱导18 d时,实验组细胞亦检测到RUNX2和OCN的蛋白表达。结论 UC-MSCs和P-MSCs具有良好的成骨分化能力,有望作为骨组织工程的种子细胞用于治疗骨缺损。
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