作者:杨纤纤; 吴亚芳; 张海骏; 杜利莉; 邵义祥鸡肌腱干细胞分离分化诱导鉴定
摘要:为了建立鸡肌腱干细胞的分离培养体系和鉴定方法,试验使用I型胶原酶消化20日龄鸡胚肌腱组织,低密度接种得到鸡肌腱干细胞,用结晶紫染色细胞克隆团块,选择50,500,5000个/cm。密度接种7—10d,镜下观察细胞形态,用细胞计数仪测定细胞增殖能力,用分化诱导试剂对细胞进行成脂与成骨分化诱导,采用油红O和碱性磷酸酶进行染色鉴定。结果表明:原代细胞及传代细胞为长梭形,接种7—10d后开始形成克隆团块,细胞生长曲线呈S型。500个/cm2的细胞密度接种细胞克隆能力与增殖能力最强;将该密度接种细胞消化后,按1×104+/cm2接种,分别对其进行成脂与成骨诱导,可发现成脂分化过程中有脂滴形成,油红0染色呈阳性;成骨分化过程中有钙结节形成,碱性磷酸酯酶染色呈阳性。说明消化20日龄鸡胚肌腱组织可成功分离出鸡肌腱干细胞,克隆增殖能力强,且具有分化多种细胞的潜能。
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